La hemina induce la autofagia en eritroblastos leucémicos
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Date
2013Author
Moor, Federico
Vergara, Agustín
Salassa, Nebaí
Colombo, María Isabel
Fader, Claudio
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Show full item recordAbstract
La autofagia es una vía intracelular mediante la cual
organelas son secuestradas en vesículas llamadas
autofagosomas para su degradación. Este proceso
fisiológico ha sido asociada a procesos como el
envejecimiento celular y la maduración de algunos
tipos celulares, como los eritroblastos, que eliminan
algunas de sus organelas por esta vía para dar lugar
al glóbulo rojo maduro. Una de las proteínas que es
requerida en la autofagia es la citosólica LC3, que
es un buen marcador de autofagosomas cuando se
asocia a la membrana del mismo.
Determinar el rol de la hemina en la maduración eritropoyética
y su relación con la autofagia, dilucidando
los componentes moleculares involucrados en
esta vía degradativa intracelular.
Nuestros resultados sugieren que la estimulación de
los mecanismos de maduración con hemina podría
inducir una respuesta autofágica en células K562
que llevaría a una maduración más rápida y eficiente.
II, III y IV Jornadas de Investigación de la Universidad
Juan Agustín Maza (2010, 2011 y 2012). I Encuentro
de Investigadores de la Red Andina de Universidades
o RADU (2011), XLIVII Reunión Anual de la Sociedad
Argentina de Investigación en Bioquímica y
Biología Molecular o SAIB (2011), III Foro Provincial
de Investigación, y reunión conjunta de las XII Jornadas
de Investigación de la Facultad de Ciencias
Médicas de la UNCuyo y las I Jornadas de Investigación
del Hospital Universitario (2012), XXIII Jornadas
de Investigación y V Jornadas de Posgrado UNCuyo
(2013) y La Brújula: Exposición de Ciencia y Tecnología
(2013).
Incubamos células K562 frente a distintos inductores
de maduración, determinando que la estimulación
con hemina produjo una mayor maduración (aumento
del porcentaje de hemoglobina). Por Western blot
analizamos los niveles de LC3 en un lisado celular,
observando un aumento de la expresión de LC3 total,
como también un incremento del procesamiento
de LC3 I a LC3 II, sugiriendo una estimulación de
la vía autofágica. Medimos los niveles de autofagia
inducidos por diferentes inductores, analizando por
microscopía confocal la colocalización entre dos
marcadores de vesículas autofágicas (GFP-LC3,
monodansilcadaverina) y lisotracker (marcador lisosomal).
Las vesículas que presentaban los tres
marcadores fueron cuantificadas, observándose que
la hemina estimuló un aumento de la formación de
vesículas autofágicas degradativas (autolisosomas).
La pérdida de las mitocondrias por despolarización. Fil: Moor, F. Universidad Juan Agustin Maza. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Mendoza. República Argentina. Fil: Vergara, A. N. Universidad Juan Agustin Maza. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Mendoza. República Argentina. Fil: Salassa, B. N. Universidad Juan Agustin Maza. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Mendoza. República Argentina. Fil: Colombo, M. I. Universidad Juan Agustin Maza. Facultad de Farmacia y Bioquímica; UNCuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Mendoza. República Argentina. Fil: Fader, C. M. Universidad Juan Agustin Maza. Facultad de Farmacia y Bioquímica; UNCuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Mendoza. República Argentina.